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mouse 是最常用的模式动物之一，而且大部分是近交系小鼠，首先要注意的一点就是小鼠的品系。
不同的小鼠品系，在某些细胞群上的抗原不一致，而且没有交叉反应。比如，T细胞的marker CD90.1主要表达在AKR/J, PL, FVB/N品系的小鼠，而CD90.2则表达于最常见的小鼠品系，如BALB/c, DBA, CBA/J, C3H, C57BL/6, NZB/-, S3L等。
如果分选mouse的T细胞，大多数情况下选CD90.2就好了。
对于mouse而言，最常用的就是脾脏了。why？因为mouse的不管是眼球取血还是尾巴尖取血，血量都极少，0.5-1ml左右。除了极特殊的实验，大部分同学都是取脾脏，然后研磨成单细胞悬液，然后再进行分选。
下面以mouse 19851 mouse T 细胞分选为例，对操作步骤进行详细的解说。
与Human的试剂盒相比，mouse的试剂盒多了一个正常大鼠血清的组分。这是干嘛的呢？阻断非特异结合，提高特异性，提高纯度的。
因为所有的mouse的抗体，都是用大鼠RAT做的，因此大鼠正常血清，含有大量的无关抗体，如果样本中有可以和抗体结合的细胞，让大鼠血清先封闭结合一番，就可以提高特异性和纯度。
重点：大鼠血清要-20C存放。
样本制备
上面已经提到mouse最常用的就是脾脏，最常见的就是脾脏的处理。
划重点，所有mouse Easysep的试剂盒都不需要裂红或者密度梯度离心去除红细胞。因为脾脏中的红细胞比例比较低，和白细胞基本是1:1的关系，如果是阳选很容易被洗掉，如果是阴选，我们的抗体cocktail里面含有去除红细胞的抗体。因此不需要再做任何的处理，可以直接进行分选。
正常的mouse 脾脏，如果处理的好，能够有1X10^8的淋巴细胞，处理的不好，也有5X10^7的细胞，因此有充足的细胞可以进行分选和下游实验。
有小伙伴问，不去除红细胞，怎么计数呢？如果是人工计数，红细胞是红的，是扁的，和圆圆的透亮的有核细胞有明显的区别。
如果是计数器计数，基本的型号都会自动的识别红细胞的。
话说对大多数的细胞类型而言，研磨脾脏就可以了。少数细胞对机械研磨处理非常的敏感，比如DC细胞，如果用研磨的方法处理脾脏，那么会对DC细胞造成损伤，导致纯度不佳。那么就需要用酶消化处理，不用担心，DC分选试剂盒里面已经提供了相应的消化液和protocol。
细胞分选 狄光辉 13683842418