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河南省洛阳市洛阳国家大学科技园
癌症治疗手段日益丰富，已被视为慢性病的当下，CTC、ctDNA就是癌症慢病管理的重要手段，从细胞层面了解肿瘤发生发展情况，早于影像学评估及时调整治疗方案，帮助患者争取时间尽早调整治疗方案，才能更好的带瘤生存,更好的防患于未然。
国内外有关循环肿瘤细胞 (CTC) 的研究与临床应用方兴未艾。由于目前有关CTC检测的各种技术手段较多，为了便于大家对此能有一个比较全面的了解，下文将目前国内外检测CTC的主要技术手段向大家做一个介绍。
CTC 是从实体肿瘤脱落入血的肿瘤细胞，它与肿瘤的转移、复发等有着极为密切的关系。有些 CTC 入血后随即凋亡，有些则只是在外周血中不断循环，而另外一些 CTC 则随血液至远端器官，形成新的转移灶。这些能够形成转移灶CTC 也被称为循环肿瘤干细胞。可见血中的CTC无论是生物学特性还是临床意义都差异极大。目前， CTC 检测在国内外已被广泛用于快速评估肿瘤的治疗疗效（包括手术及药物疗效）、预后判断，以及肿瘤耐药与复发的即时性监测等。
CTC检测主要由两个技术环节构成：分离与鉴别，也就是人们常说的“抓得着”与“看得见”。分离与鉴别方法的有效性决定着CTC检测的灵敏度与特异性。让我们首先看看人们是如何解决“抓得着”CTC的问题的。目前，国内外各种分离CTC的技术手段基本可归为3大类：过滤法，捕获法及富集法。
过滤法：代表技术为iSET。该方法使用孔径为8 微米的细胞筛过滤去除4-5微米的白细胞，从而达到分离较大的 CTC 的目的。本方法的最大优点在于便捷。然而随着近年来人们对CTC了解的不断加深，发现很多CTC实际上与白细胞一样大，有些甚至只有白细胞的一半或更小。目前有证据显示，这些小或超小CTC的数目比例在有些瘤种中可高达1/3。人们对于这些小的CTC显然不能视而不见。实际上有关过滤法灵敏性较低的客观评价国外已有多篇报道，而这些小CTC的特殊重要临床意义也已经引起了人们的密切关注 (Alunni-Fabbroni and Sandri, 2010, Methods 50:289；Coumans, etal., 2010, Ann. Oncol. 21:1851）。
捕获法：主要代表方法为CellSearch及微流体(microfludics)。该方法的原理是将抗 CTC 表面特定蛋白标示物 (EpCAM) 抗体与磁珠或微流体进行偶联，利用这些固相载体上的抗体直接从血中捕获 CTC ，也就是人们常说的钓鱼法。该方法的优点是简便，但是近来人们发现，间质化肿瘤细胞 (Gorges, etal., 2012, BMC 12:178) ，以及许多循环肿瘤干细胞 (Zhang, etal., 2013, Sci. Transl. Med. 5:180)，尤其是多种不同组织来源的肿瘤细胞上并不表达此特定蛋白EpCAM。最近的研究显示，在检测的134种不同肿瘤标本中，高达30% 肿瘤的EpCAM为阴性(Went, etal, 2004, Hum. Pathol. 35:122)。这种依赖肿瘤细胞自身生物学特性的方法极大地限制了应用该方法检测不同肿瘤的CTC，而且分离的 CTC 被免疫磁珠所包裹，且又被抗 EpCAM 抗体活化(Munz, etal., 2009, Cancer Res. 69:5627; Veillete, et al., 1988. Cell 55:301) ，故不适于多种后续研究。
富集法：原理是有效去除血液中的红细胞、白细胞及血浆等组份，从而达到富集非血源性CTC的目的。该方法不依赖于肿瘤细胞表面标示物 (如EpCAM）的表达，且不受CTC大小的影响，因而可以有效富集各种不同肿瘤来源且大小不同的CTC 及癌栓（circulating tumor microemboli, CTM)。富集后的CTC没有被抗体触及，维持了较好的自然状态，可适于后续一系列分析。富集法又可分为阴性富集（negative enrichment）及差减富集（subtraction enrichment, SE)。两者最大的区别在于不同于阴性富集的低渗裂解红细胞，SE选择了非低渗溶破法去除红细胞，因而避开了对CTC的低渗损伤，从而使得到的CTC适于后续的原代肿瘤细胞培养、单细胞分析等。自从赛特生物与北京协和医院在2009年共同报道了早期SE方法可有效富集各种肺癌CTC细胞，并发现86%的肺癌复发病人其CTC为阳性后（Wu etal.2009，J. Thorac.Oncool. 4:30), 优化后的SE方法已被广泛应用于多种肿瘤CTC的研究与临床应用 (Li etal, 2014, Oncotarget 5:6594；Chen etal, 2013, CCA 219:57)。
大家对如何“抓得着”CTC的各种方法已经有了比较全面的了解，我们再看看人们是怎样解决“看得见”CTC的问题的。CTC的鉴别方法主要分为多重PCR，免疫荧光染色及荧光原位杂交（FISH）等。
多重PCR (multiplexPCR) 与RNA探针检测：多年前人们已从技术上解决了利用多重PCR手段对微量稀有细胞进行检测的技术难题，可在2 个肿瘤细胞上进行多基因检测。但时至今日，无特异性肿瘤标示物或基因一直还是困扰人们的难题，基于特异性较差等原因，此方法已不再是人们关注的重点。
近年来，美国Affymetrix公司发明了使用RNA探针检测CTC的技术，可帮助人们在mRNA水平对CTC进行检测与研究。但其实际意义还有待于较大样本的临床验证。
抗体染色：实体肿瘤细胞一般均为上皮来源，细胞内会表达角蛋(cytokeratin, CK) 或其他肿瘤标示物 (如HER2)。借助免疫荧光染色，可对来自实体瘤CTC 中的瘤标进行识别，从而达到检测CTC的目的。这也是目前检测CTC的最常见方法。然而近年来大量的临床实验数据显示，在CTC形成过程的间质化(EMT)阶段，与EpCAM相同，大量的CK也会降解(Willipinski-Stapelfeldt etal, 2005, Clin. Cancer Res. 11:8006)，从而在CTC检测过程中出现因“看不见”而造成的假阴性。
免疫荧光染色-FISH检测 (iFISH)：染色体荧光原位杂交(FISH) 技术检测染色体数目异常的肿瘤细胞早已被人们广泛接受。但有别于常规的FISH方法，iFISH的技术原理是将免疫荧光染色与FISH进行了有效整合，在区分血源性与非血源性细胞的基础上，对CTC细胞同时进行染色体异倍体检测与任一瘤标表达的检测。相对于单一使用免疫荧光染色或FISH方法，iFISH可将染色体或瘤标异常的CTC有效检测出来，从而极大地提高了检测的灵敏性与特异性。此外，根据同一CTC上的瘤标表达与染色体数目，可将CTC进行亚类分型，每一不同亚类的CTC细胞在肿瘤的耐药、药敏、转移与复发等方面都有着不同的临床意义。赛特生物与北京肿瘤医院共同发表的最新临床实验结果提示，胃癌病人中的8号染色体3倍体CTC具有内源性耐药的特性，而4倍体或5倍体的CTC则可能具有继发性耐药的特性 (Li etal, 2014, Oncotarget 5:6594)。该发现为医生今后制定更为合理的肿瘤个体化治疗方案提供了更可靠的依据。
随着人们对CTC了解的不断加深，各种新的CTC检测手段也会不断出现。其中由美国Affymetrix 与Cytelligen 公司正在联合开发的差减富集 (SE)-iFISH-RNA FISH整合技术平台将令人们首次在单一CTC细胞上进行DNA，RNA及蛋白表达三位一体的研究。
早在1869年，CTC在血液涂片中就已经被观察到了，在癌症病人死后尸检时也观察到了CTC的存在。讲基因组学的故事常常从孟德尔说起，而这篇文献但凡是想介绍下CTC历史的文章都必被小辈拱手引用。这时间可比随着医学的发展与进步，人类欲给癌症摘掉绝症的帽子早了一百多年。
随着CTC分离和鉴定技术的发展，对于CTC的研究再次成为肿瘤领域的焦点。有人对PubMed下circulation tumor cell 这一关键词检索发现2013-2015年间全球每周新文献数量在20-25篇左右。今天就带大家一起走进这个大热点。
基础篇
CTC从哪里来
循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cells，CTC） 主要来源于肿瘤组织自发脱落的肿瘤细胞或是人为操作带入外周血的肿瘤细胞。
CTC在脱离了肿瘤组织的环境后往往很脆弱，失去细胞间相互作用而发生失巢凋亡，被血液中的免疫细胞攻击致死，或者进了循环系统就像猫咪跳进了洗衣机，被血流的剪切力给冲死了。
但是如果CTC发生了上皮间质转化，或者是形成循环肿瘤细胞团（circulating tumor microemboli，CTM） 组团外出，那么存活下来并且发生转移的概率则大大增加。
恶性肿瘤细胞为了获得运动性和侵袭性，会丢失某些上皮细胞的表型（包括形态、表面抗原、基因表达等）并获得某些间充质细胞的表型，这就是上皮-间质转变（EMT）（图1）。多数恶性肿瘤细胞在脱离原发灶的过程中发生EMT。
图1 CTC从原发灶到转移灶过程中表型变化的模式图
（Cancer Cell2013,23:272）
最近研究发现，CTM与间质细胞表型密切相关，并且高比例的间质细胞表型CTC与化疗耐药有关（Science 2013;339:580）。另外的研究显示，CTM可抵御失巢凋亡（anoikis）、耐受细胞毒药物（J Clin Oncol 2012;30:525）、比单个肿瘤细胞具有更强的转移潜能（Clin Cancer Res 2001;7:4080）。因此，CTM和间质细胞表型CTC（EMT CTC）与单个普通CTC相比，与预后的相关性可能更强。
CTC与肿瘤转移
肿瘤转移的机制尚有许多不确定之处，有待验证。但是近年来CTC的研究揭示了CTC是恶性肿瘤患者出现术后原位复发、远端转移和浸润的重要原因。上皮间质转化则可看做是“种子-土壤”假说的现代版本（图2）。
图2
“种子-土壤”这个名字一出，相信大家已经理解的八九不离十了。原发肿瘤组织产生“种子”，“种子”找到合适的土壤生长成为新的肿瘤组织。目前研究发现上皮间质转化就是产生种子的关键一步。
上皮间质转化（Epithelial-mesenchymal transition, EMT） ，顾名思义就是上皮细胞在形态学上发生向间充质细胞表型转变的过程。这一过程本是胚胎发育的基本过程，也是炎症反应、伤口愈合等组织修复再生时所必须的。然而肿瘤细胞在一定条件下发生EMT转化就会得到新技能：迁移。
上皮细胞间连接紧密，相对稳定不可移动。间质细胞很少有细胞连接，结构松散分散于细胞外基质中。这一转化是受到严格调控的过程，基因表达的改变促使上皮细胞停止分裂，离开原本附着的基底膜，切断与周围细胞的联系，细胞骨架也发生相应的变化以增强运动能力。
CTC与病程
转移是肿瘤发展进程中的重要特征,CTC的数量与肿瘤负荷、病程发展息息相关。
图3.这是一项针对乳腺癌病人的研究案例，虚线表示了影像学的评估，PD代表疾病进展，PR代表部分缓解，SD表示疾病稳定，这一评价体系是NCI、FDA等全球多家癌症研究机构推荐的实体瘤疗效评价标准。主要通过影像学方法评估瘤体大小的变化来评价疗效。可以明显看到在第一个疾病缓解期，CTC水平已经上升，换药后，CTC的下降也即时反应了药物的有效性。
据有关研究发现，CTC对于病情进展的指示作用要比影像学评估平均早6-8个月的时间，可以帮助医生及时掌握病情，调整治疗方案。
技术篇
在开始正题前，我要讲一个警匪的故事，如果你能勉强接受这个不完备的假设，或许对于理解CTC的技术有一点点帮助。
人体的内部其实很像一座城池，循环系统就是承载它运转的交通系统，里面跑着的红细胞像运输员，数量极为庞大；白细胞像治安官负责抓坏蛋。城市总有黑暗面，而肿瘤就是黑社会，黑恶势力的暗自成长就会影响城市正常的功能，掠夺城市运转的社会资源。黑社会一方面会扩张自己的领地，而那些小弟里面也有不甘心于此，妄图自立山头。
现在回头看一下之前的内容，循环系统里面会有一些小流氓是出来闲逛的，他们比较容易被警察捕获或是其他原因挂掉。另外一些小流氓或许内心已经悄悄变化，长出了一颗王者的心，他们比较耐磋磨，条件适宜的情况下，可以另辟疆土自立门户。有一些干脆组团出发，抵御循环系统恶劣的环境。
CTC的富集
转移是肿瘤发展进程中的重要特征,CTC的数量与肿瘤负荷、病程发展息息相关。只是观测到CTC并不能作为有效的预后标准，科学的评价必须建立在CTC有效富集的基础上。CTC这种细胞计数即能反映预后的标志物，富集方法对于检测有效性的影响可想而知。然而CTC沉浸在血细胞的海洋里，CTC含量之低犹如在文学巨著里面挑错别字。那么我们是如何解决这个问题的呢？
图4.
方法1，生物富集
图5.
负责运输的红细胞与CTC和白细胞的个头差别比较大，分离起来不成问题。主要的难点集中在白细胞与CTC的分离上。
正向富集——正面出击，我们直接寻找到小流氓
黑恶团伙总会带一些别人不带着的东西，比如举着个棒子。我们用特异性寻找棒子的方法来找到CTC细胞。
最常用的棒子就是EpCAM，通过EpCAM富集是一项成熟的技术，cellsearch系统也是通过它对细胞进行分选的。
EpCAM全称上皮细胞粘附分子，是细胞膜上的一种蛋白质，正常情况下在多数上皮组织上都有所表达。而在造血系统来源的细胞、脑组织和血管内皮细胞中没有明显的EpCAM的表达，是一种特异性很好的分选方法。
负向富集——排除法，去掉不是坏人的人，剩下的就是坏人
流氓带着棍棒，当然治安官也会有一些特点比如随身携带专用电台，所以只要我们能把带电台的治安官找到，剩下的就是我们要找的CTC啦。白细胞是虽然种类繁多，但是有一点是一致的，他们都表达CD45。
CD45是一种白细胞共同抗原，在细胞之间沟通信号传导上有关键作用，在几乎所有的白细胞上都有表达。警察们互相联系的手台要保持一致嘛。
方法2，物理富集
图6.
运输员，警察和小流氓的个头不一样、密度不一样、带的电荷不一样、或者流体中运动状态不一样，这些物理性质也帮助我们分选出CTC。但是这些物理方法主要针对单个的CTC，聚成团的CTC有可能在分离过程中因为物理性质与单个细胞不同而无法筛选出来。
方法3，结合着用
先负向负极去除绝大多数白细胞，再进行正向富集，可以大大提高正向富集的效率。
物理富集和生物富集结合着用，改造生物富集的物理条件也可以提高效率。
在EpCAM以外增加其他的捕获靶标分子，也可以减少因为EMT造成的CTC细胞丢失。
CTC的检测
1.计数
对富集到的细胞进行鉴定、计数是最常规的手段。
目前的鉴定手段也是非常多的，常用的有通过细胞染色体变异来判断（FISH），或是通过细胞表面抗原免疫荧光来判断。
但是一旦落实到计数层面就会有一个小的问题，我们之前说过如果CTC是个小流氓的话，它的危害程度并不完全一致。有些难成气候，在循环系统中存活较短，不会四处兴风作浪。然而另一些则怀揣开疆僻壤之心，自立门户，危害极大。
单纯的通过肿瘤细胞的一些特性只是鉴定了肿瘤细胞，而将这两类细胞一概而论，或许并不是一个理想的选择。
2.q-PCR
撬开CTC的外壳，发现他们真实的状态，或许是一种有效的方式。
研究发现，CTC在表达上皮细胞基因的同时，表达类似干细胞及上皮间质转化的基因，这些基因的表达对肿瘤患者的预后评估有更为精准的临床意义。
在对转移性结直肠癌患者的研究中发现，高水平表达CK20或高水平表达Survivin的患者的总生存期分别是9个月和10个月，与CK20和Survivin表达水平都低的患者总生存期（33.2个月）相比，总生存期明显下降。
图7.
CTC-CK20或CTC-survivin其中任一个标记物在转移性结直肠癌患者中的表达水平的高低都是对其总生存期最强的预测因子，而对于二者的综合评价，会对患者的预后有更全面的评估。
图8.
细胞角蛋白CK家族是上皮性肿瘤较特异的免疫组化标志物，CK19和CK20是肿瘤组织免疫组化中常用的标志物。survivin是细胞凋亡的抑制分子，因其有利于细胞存活而得名“存活素”，正常情况下仅在胚胎和发育中的胎儿组织中出现，终末分化的成人组织中一般没有表达。
然而上皮间质转化这一与复发转移风险高度相关的过程，会使细胞部分丢失或全部丢失上皮细胞的特征。因此这一过程通路上重要基因的表达结合干细胞标志物ALDH1也是我们评估复发转移风险的指征。
高灵敏度的qPCR加上合理选择的marker基因，是对CTC细胞的精细刻画。让我们不只是清点数量，而是在一众举棒子的小流氓中可以判断他们的搞事情的能力到底有多高。
CTC的行业动态分析
液体活检CTC技术一经问世便以其独特的优势迅速获得广泛的关注，正逐步走进临床实践阶段，面对液体活检技术的强势崛起以及其背后巨大的市场空间，众多生物科技型公司纷纷进入该领域以期能抢占行业制高点。
1.洛阳爱森生物
洛阳爱森生物是一家专门做磁珠，磁珠法核酸提取试剂盒，核酸提取仪，磁力架的厂家。目前在游离DNA核酸提取这块已经有很成熟的产品。
另外一个公司莱尔生物推出阴性富集循环肿瘤细胞（CTC）检测试剂盒，该试剂盒主要适用于循环肿瘤细胞的检测，定位于科研+临床服务型，具有灵敏度高、特异性强、操作简便、适用范围广等优势.
图9.阴性富集循环肿瘤细胞（CTC）检测试剂盒
但现阶段由于缺乏足够的临床数据支持，限制了其使用范围，而且由于是采用的阴性富集技术和纯手工操作，受人为影响因素较大，对CTC的捕获分离效率还有待进一步的提升和优化。但是作为国内率先推出的一款CTC领域专用的辅助诊断类的试剂盒仍具有重要的意义，因为该试剂盒的出现让人们看到了CTC产业化的可能，也让人们看到了产业化之后的巨大市场空间。
2.美国Fluxion Biosciences公司
2013年美国Fluxion Biosciences公司成功开发出IsoFlux系统（图10），该系统主要采用的是阳性富集技术，即是从外周血液中直接捕获表达特定抗原的CTC细胞，具有稳定、全自动化、人工干预少的特点，能够达到较好的分离目的。但是该系统尚未获得FDA审批进入临床验证，目前主要投放在科研院所进行稳定性和可靠性的测试，而且其进入中国市场也暂无明确的时间表。
图10. IsoFlux全自动分离CTC系统
IsoFlux系统虽然实现了对CTC捕获、分离的自动化，但也存在一些难以克服的技术缺陷，比如其只能进行CTC的分离，而对后续的计数、鉴定尚没有配套仪器，仍然依赖于其他的染色方法，而单纯的分离CTC对于临床诊断并没有太大的意义。而且阳性富集技术要求从大量的血细胞和白细胞中识别并结合数量极少的CTC，这就不可避免的会造成CTC的遗失，而这对于早期肿瘤患者的诊断可能会造成误判。
3.强生子公司Veridex
强生子公司Veridex开发的Cell search（图11）检测系统是全球第一个也是唯一经过美国食品药品监督管理局（FDA）和中国国家食品药品监督管理总局（CFDA）批准，用于恶性肿瘤疾病辅助诊断的检测CTC的产品.
图11.Cell search外周血循环肿瘤细胞分析系统
Cell search的出现无疑具有标志性的意义，因为CTC检测技术第一次被允许走进临床，服务病患。
Cell search主要利用免疫磁珠特异性的识别含EpCAM蛋白的上皮来源的CTC细胞，并在磁场的作用下使其与血细胞分离开，该系统可以应用于预测有转移性的乳腺癌、结直肠癌或前列腺癌的无进展存活率和总存活率，由于其可靠性和高灵敏性在欧洲也被认为是一个有效的检测诊断工具。
可是作为一款明星产品却未得到广泛的市场认可，目前因为多种因素已经停产并终止销售，导致其停产的原因是多方面的，既有技术的缺陷，诸如不能实现下游的分析，也有其他方面的原因，诸如价格昂贵，患者难以承受，需要动态监测等。
4. 益善生物
2014年8月18日，益善生物正式推出CanpatrolTM CTC（图12）检测服务，Canpatrol TM是免疫去除结合纳米过滤法的第二代CTC富集技术，不需要依靠特异性抗体的捕获，对白细胞的去除效率非常高，而且该技术可以保证在较少的血液中富集到更全面的CTC，更能避免发生EMT过程后具有转移潜能细胞的丢失，而且富集到的细胞存在于滤膜上，有利于开展后续的各种检测、分析，具有良好的下游拓展性。
图12. CanpatrolTM CTC检测技术平台
该系统集合两种分离手段提高了CTC分离效率，不失为CTC检测方法的进步，目前该系统已经在一定的范围内开展实验研究，有文献报道曾有课题组利用该系统对1000余临床样本进行了分析，并且实验结果优于Cell search的实验结果。但该系统依然存在收费昂贵，难以推广的难题，目前市场受众人群很少，距离大规模应用还有一定距离。
5.立迪生物
2015年4 月，上海立迪生物与新加坡明策生物医学成立循环肿瘤细胞分离与检测联合实验室，宣布将用ClearCell®FX1系统（图13）进行血液中CTC的分离.
作为国内第一家全自动CTC分离和检测实验室，其采用的该系统具有无创、实时、精准、全面的技术优势。该系统集成了已获取专利的微流体生物芯片CTChips®，其分离出的CTC无损伤、具有细胞活性，可应用于下游细胞培养及细胞水平实验、分子检测、肿瘤动物模型建立等实验.
图13. ClearCell®FX1分离检测系统
立迪生物-明策生物 CTC联合实验室还致力于为生物技术公司、制药公司以及医疗机构提供药物研发和治疗研究服务，正努力构建起全球领先的人源肿瘤模型及临床前药物筛选平台，加速抗肿瘤药物的研发。目前该系统处于试运行状态，还没有广泛的接收临床样本检测，而且加之渠道所限，受益人群较小。
6.珠海丽珠医药
为完善公司产品布局和进军液体活检领域，珠海丽珠医药融资收购了由诺贝尔化学奖得主Dr.AlanJ Heeger于2008年创办的专注于液态活检的CYNVENIO BIOSYSTENS公司，该公司开发出了LiquidBiopsy®全自动分析技术平台（图14）.
图14. LiquidBiopsy®全自动检测平台
该系统集合了多项先进的专利技术，可以富集分离出更高纯度、更高回收率的CTC细胞，并且直接对接下游的检测手段，实现对样本的实时定量分析。而且该项检测技术已经通过了美国CLIA和CAP的认证，可以用于CTC和ctDNA的基因测序，能够检测出单点突变。相比较于cellsearch系统，LiquidBiopsy可以直接对接细胞计数，无需人工干预，还可以实现二代基因测序，另外由于采用了多种混合抗体捕获提高了捕获灵敏度，减少CTC的丢失。
7.上海格诺生物科技
目前国内唯一经CFDA批准应用于临床的首个肺癌循环肿瘤细胞检测--叶酸受体阳性CTC检测试剂盒（图15）由上海格诺生物科技有限公司推出。
该试剂盒利用配体类似物交联核苷酸片段作为检测探针，通过细胞表面特异性受体（叶酸受体，FR）与其配体类似物的结合来实现探针与CTC细胞的结合，将CTC数目转化为探针的数目，通过对探针的PCR定量检测来计算CTC的数目.
在历时三年的多中心大临床的研究过程中显示了较高的灵敏度和特异性（本试剂盒对肺癌检测的灵敏度为80.2%和特异性为88.2%），已经获得III类医疗器械证。
该试剂盒适用于肺癌高危人群早期筛查。包括其年龄段为55-74岁；吸烟指数>200支/年；年龄大于50岁且含有以下危险因素之一：有肿瘤家族史，既往有慢性阻塞性肺病、肺纤维化、肺结核病史，及矽肺等职业病接触史。目前，全国已有20000例患者接受该试剂盒的检测。
图15. 肺癌循环肿瘤细胞检测--叶酸受体阳性CTC检测试剂盒
作为体外诊断的一个分支，液体活检有其独特的先天优势，这也决定其具有广阔的应用前景和良好的市场预期。预计到2020年全球液体活检市场达到230亿美元 。中国2015年液体活检市场规模约50亿元，未来五年有望增长4倍至200亿。这也吸引了国内外为数众多的生物公司投身其中，除上述介绍的之外，还有诸如上海奇康生物科技开发有限公司、海吉力生物有限公司、上海芯超生物、武汉友芝友医疗、宁波美晶医疗、上海浦美生物有限公司、华大智造推出的MGI EASYCELLTM系统、宝腾生物基于cellsearch系统的（CTC）检测平台等。
目前，各大厂家竞相涌入液体活检领域，各自拥有独特的技术手段，新产品层出不穷，性能指标也在不断优化，在可以预期的将来将会有更好、更优质的CTC检测试剂盒或相关自动化设备问世，以便能够早日造福病患。
CTC检测的应用
何时应该进行CTC检测呢，其实在肿瘤治疗的任何时期都可以切入，对病程达到动态监测的目的。一些ctDNA检测显示癌症高风险人群的早期筛查。
源正细胞精准医疗将ctDNA、CTC等液体活检应用到癌症患者探索性的疾病管理，随时监控病情的发展（主要是术后无瘤的肿瘤患者），间接的判断MASCT或其它治疗效果，修订治疗方案。对于ctDNA检测发现多个肿瘤驱动突变的健康人群进行癌症的早期筛查，进行探索性的健康管理。
癌症治疗手段日益丰富，已被视为慢性病的当下，CTC、ctDNA就是癌症慢病管理的重要手段，从细胞层面了解肿瘤发生发展情况，早于影像学评估及时调整治疗方案，帮助患者争取时间尽早调整治疗方案，才能更好的带瘤生存,更好的防患于未然。
生物磁珠磁力架：www.ex-dna.com磁珠法核酸提取试剂盒