免疫磁珠分选 + 荧光原位杂交技术：促进多发性
Source:生物磁力架Author:admin Addtime:2018/08/10 Click:
很强的异质性，何为异质性？
在MM患者中，使用同样的治疗方案，有的患者化疗效果好，无病生存期很长，而有的患者化疗效果差，很快就复发，这是为什么呢？因为MM有很强的异质性，这和肿瘤细胞的生物学特征相关。MM是遗传学高度复杂的疾病，几乎所有患者均表现出细胞遗传学异常和多样化的克隆异质性，而不同的细胞遗传学异常提示着疾病的不同进程或者预后。
如何检测MM细胞遗传学异常？
MM的骨髓中原始浆细胞比例较低，增殖速度不高，很难获得满意的分裂相。因此，选择合适的检测方法尤为重要。免疫磁珠分选技术+荧光原位杂交技术（FISH）两者结合，能够富集MM细胞，提高细胞遗传学异常的检出率和准确性，完美解决了MM原始浆细胞比例低、分裂相难以获得的问题，是目前国际公认的MM细胞遗传学的检测方法。
什么是免疫磁珠分选技术？
MM细胞基本都为CD138阳性细胞，据此我们使用CD138磁珠结合至MM细胞（如图3所示紫色细胞）上，经过磁场时，没有结合磁珠的细胞被洗脱，撤去磁场后收获细胞，所得到的均为CD138阳性细胞，即MM细胞。这个方法可以富集骨髓中的异常浆细胞，大大提高检测的敏感性和特异性。
什么是荧光原位杂交技术？
针对多发性骨髓瘤的特征，荧光原位杂交（FISH）技术将所测染色体片段制成荧光标记的碱基序列，通过与染色体杂交而发出特定的荧光信号。FISH可以检测各种来源的骨髓瘤细胞标本，对MM细胞是否处于分裂期并无特殊要求，特异性高，敏感性强，并能检测既往冻存的固定标本和石蜡包埋标本，对病例进行回顾性分析。
免疫磁珠分选 + 荧光原位杂交检测在哪做？
武汉协和医院血液病研究所作为国家卫生部（现卫计委）课题《荧光原位杂交技术检测多发性骨髓瘤和慢性淋巴细胞白血病分子细胞遗传学异常的临床应用研究》的主要合作单位，于2007年率先在国内开展荧光原位杂交检测，并于2011年开展免疫磁珠分选结合荧光原位杂交检测技术，迄今为止已对数千余例次MM标本进行细胞遗传学检测。除了常规的骨髓标本，武汉协和医院血液病研究所还成功对一些特殊疑难病例（如肿块穿刺液等）进行检测，得到细胞遗传学结果，帮助这些患者明确诊断并评估预后，检测技术属国内外先进水平。在多年检测中积累了宝贵的经验和数据，在国内外刊物发表相关文章，并在国内学术会议做演讲。
MM细胞遗传学异常的临床意义？
细胞遗传学异常是评估MM预后、选择合适治疗方案的重要指标之一，《中国多发性骨髓瘤诊治指南（2015年修订）》（表1）和美国国立综合癌症网络（NCCN）的《多发性骨髓瘤诊治指南》中（表2），均建议在MM诊断早期，使用FISH技术进行细胞遗传学评估。
表1：《中国多发性骨髓瘤诊治指南（2015年修订）》中建议使用FISH技术对MM进行细胞遗传学检测
表2：美国国立综合癌症网络（NCCN）的《多发性骨髓瘤诊疗指南》，建议使用FISH进行细胞遗传学检测
MM细胞遗传学异常如何进行预后分层？
美国Mayo骨髓瘤分层及风险调适治疗（sSMART）分层系统（表3）较为广泛使用，它是Mayo诊所最初在2007年提出，以细胞遗传学检测为基础，根据危险分层不同制定分层治疗策略，目前已更新至2013版。2015年国际骨髓瘤工作组修订的国际分期系统（R-ISS）将血清β2微球蛋白、高危细胞遗传学异常和乳酸脱氢酶结合在一起，不同分期之间的5年PFS率和OS率差异具有统计学意义（表4）。
表3：Mayo骨髓瘤分层及风险调适治疗（sSMART）分层系统
表4：2015年国际骨髓瘤工作组修订的国际分期系统（R-ISS）
结语
多发性骨髓瘤在生物学和临床上有很强的异质性，这使其在疗效和预后方面差异极大。应用细胞遗传学对MM患者进行危险分层、评估预后，有助于选择合适的治疗方案，进一步实现精准化诊疗，为每一位患者量身打造治疗计划，使患者实现最大的生存获益。
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