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尿检是医院的常规检测，那么你了解如何依据尿液的相关生物学实验么？下面小编从最基础的核酸提取方法分别介绍尿液沉渣的DNA和RNA提取，也许你会疑问：尿液的核酸有何用途？尿液的核酸有助于了解患者是否被一些微生物感染和一些癌症的早期辅助诊断等如：尿液中人巨细胞病毒核酸检测；尿液中HPV DNA检测；尿液Inc RNA在前列腺癌早期诊断的研究等等。当然，市场很多公司已经出售很多尿液核酸提取的试剂盒了，本文主要介绍几种传统的手动提取方法。
尿液沉渣DNA提取方法：
方法：
①高速离心沉淀法: 取尿液1 ml 于EP 管中，4 ℃、12 000 rpm 离心10min，弃上清，取残留在管底的少许液体2 μl 作为PCR 反应的模板；
②SDS 煮沸裂解法: 取尿液1 ml 加入EP管中，4 ℃、12 000 rpm 离心10 min，弃上清。此时管底沉淀中会残留少许尿液，向其中加入20 μl 0． 3%SDS，置沸水浴中煮沸10 min 后，马上移至冰盒，待完全降温后，于4 ℃ 、12 000 rpm 离心10min，取上清2μl 作为PCR 反应模板。
③NaOH 煮沸裂解法: 取尿液1 ml 加入EP 管中，4 ℃、12 000 rpm离心10 min，弃上清。此时管底沉淀中会残留少许尿液，向其中加入20 mM 的NaOH 10 μl，置沸水浴中煮沸10 min后马上移至冰盒，待完全降温后，于4 ℃、12 000 rpm离心10 min，取上清2 μl 作为PCR 反应模板。
④ Tris饱和酚抽提法:取尿液1 ml 加入EP 管中，4 ℃、12 000 rpm离心10 min 弃上清，轻轻控干，向沉淀中加入的PBS300 μl及SDS 30 μl，室温放置1 h，加入330 μl Tris 饱和酚，轻轻颠倒混匀数次，4 ℃、12 000rpm 离心10min，轻轻吸取上层液体250 μl，加入饱和NaCl 溶液22 μl 及2． 5 倍体积的冷乙醇，轻轻混匀，4 ℃、12 000 rpm 离心10min，弃上清，加入70% 冷乙醇1 ml，4 ℃、8000 r 离心10 min，弃上清，轻轻控干，晾干20 min，向管底加入双蒸水20 μl，混匀，制成DNA 溶液待用。
尿液沉渣RNA提取方法：
从-80℃冰箱取出加入过Trizol的尿沉渣，使用斡旋混合仪震荡使尿沉渣细胞完全裂解，室温静置3-5 min；加氯仿200 ul ，剧烈震荡15-30 s，再室温静置5 min。4℃ 12000g离心15 min,可见液体分层。
轻轻将上层透明水相移至一个新的1.5 ml EP管中，此步骤需小心，勿吸到水相下层；此后，加入500 ul的异丙醇，轻轻上下颠倒混匀，室温静置15 min。4 ℃ 12000g离心15 min。如果RNA足够多，可见管底白色沉淀，但一般尿液中沉渣RNA量很少，一般看不到白色沉淀，如果尿液中RNA样品中白色沉淀明显，有可能是混有其他杂质。
轻轻弃掉上清液，加入1ml 75%乙醇，4 ℃ 7000g离心5 min，弃上清。
室温静止几分钟，直至管底的RNA的乙醇残留挥发干净，加入20-50ul去核酸酶水溶解RNA。
检测RNA完整性和浓度。
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