核酸提取试剂盒（磁珠法）使用说明书
【产品名称】
通用名称：核酸提取试剂盒（磁珠法）
英文名称：nucleic acid extraction kit（Magnetic beads）
【产品型号】 Ex-DNA/RNA
【包装规格】 1000人份/盒、10000人份/盒
【预期用途】
从血清、血浆、淋巴液、尿囊液、精液、唾液、口腔拭子、无细胞体液、细胞培养上清液或各种核酸保存液中分离纯化高质量核酸。
【检验原理】
本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统，快速、高度敏感，有效的从样本中提取病毒DNA和RNA。以胍盐、表面活性剂和蛋白酶破坏病毒外壳将核酸释放在缓冲体系中，加入特殊包被的磁珠，磁珠在缓冲体系下对目的核酸具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的核酸，洗涤体系可以除去溶液中存在的蛋白、小分子等杂质，能够达到快速分离纯化核酸的目的，且不使用氯仿等有毒试剂。
【主要组成成分】
※裂解液B初次使用应吸取550ul溶解液S进行溶解，并充分混匀。
※不同批次试剂盒中各组分禁止混用。
※实验前，客户应自备异丙醇(分析纯，无菌无RNase污染)。
【储存条件及有效期】
裂解液B未溶解和溶解后均保存于-20℃，同时应避免反复冻融；裂解液C保存于-20℃，避免反复冻融；其他成分保存于4～8℃。试剂盒未开封有效期为6个月，开封后应在1个月内用完。
【样本要求】
1. 适用标本类型：血清、血浆、淋巴液、尿囊液、精液、唾液、口腔拭子、无细胞体液、细胞培养上清液或其他的液体样本。
2. 标本采集：
2.1血清——采集2ml静脉血，注入无菌的干燥采血管，禁止使用含有肝素钠或其他抗凝剂的采血管，室温（20~25℃）放置30~60分钟，血液样本可自发凝集析出血清，或使用水平离心机，3000r/min离心5min；吸取上层血清，转移至无菌无RNase离心管内保存。
2.2血浆——采集2ml静脉血，注入含EDTA或枸橼酸钠抗凝剂的采血管，立即轻摇采血管混合5~10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5~10分钟后即可分离出血浆，转移至无菌无RNase离心管内保存。
2.3淋巴液、尿囊液、精液、唾液、口腔拭子、无细胞体液、细胞培养上清液等样本的采集参考常见医疗样本采集方式，保存于无菌无RNase离心管内待提取。
2.4非液体状态含病毒标本——可液化后以液体标本形式使用本试剂盒进行提取。
3. 样本保存和运送：经上述处理后的待测样本可立即用于检测，或-20±5℃保存(3个月)，长期保存请置于-70℃以下。应避免反复冻融。标本运送采用冰壶加冰或泡沫箱加冰密封进行运输。
【检验方法】
1. 裂解
取200ul样本到1.5ml EP管中，加入300ul 裂解液 AS，10ul裂解液 B，4ul裂解液C，混合均匀（可用漩涡振荡器，1200～1800rpm）。(由于裂解液B和裂解液C用量较少，可以和裂解液AS预混为裂解液Mix，每份分装裂解液Mix 314ul)。把离心管置于恒温水箱中56℃温育10min，每隔2~3min，混匀一次。
2. 结合
将EP管从温育设备中取出，加入振荡混匀的10ul磁珠S，加入异丙醇300ul （自备）；室温下颠倒混匀5min。然后将EP管置于磁力架上进行磁分离，将EP管连同磁力架上下翻转几次，保证管盖上无磁珠残留，开盖，吸弃废液，（吸净管盖及管底残液）。
3. 洗涤
（1） 加入500ul洗涤液AW，震荡混匀2min，然后将EP管置于磁力架上进行磁分离，将EP管连同磁力架上下翻转几次，保证管盖上无磁珠残留，开盖，吸弃废液，（吸净管盖及管底残液）；
（2） 加入500ul洗涤液SW，震荡混匀2min（若磁珠有结块现象，加大震荡力度和洗涤时间，尽量使磁珠分散），然后将EP管置于磁力架上进行磁分离，将EP管连同磁力架上下翻转几次，保证管盖上无磁珠残留，开盖，吸弃废液，（吸净管盖及管底残液）。
（3） 将EP管置于磁力架上，晾干10分钟，根据室内温度和湿度可适当延长或缩短晾干时间。或用无菌风吹干（提取RNA时注意隔绝RNase环境），可有效减少晾干时间。
4. 洗脱
加入50-100ul洗脱液S，缓慢抽吸混匀，56℃温育10min。每隔2～3min轻摇EP管几下混匀。温育结束后，将离心管置于磁力架上进行磁分离，抽取上层清液保存于新的离心管中，进行下游实验，如不能及时进行下游实验，DNA样本可保存于-20℃，RNA样本可保存于-80℃。
【检验方法的局限性】
样本检测结果与样本收集、处理、及保存质量有关，其中任何失误都将会导致结果不准确。如果在操作中没有控制好交叉污染，可能出现假阳性结果。
【产品性能指标】
当样品中甘油三酯浓度≦300mg/dL，胆红素浓度≦10mg/dL，血红蛋白浓度≦200mg/dL，总蛋白≦10g/dL，IgG≦1g/dL浓度时，测试结果的干扰偏差小于±10%。
【注意事项】
1. 裂解液B管中粉末状固体，初次使用，加入550ul溶解液S溶解，溶解前最好在离心机上短暂离心，以防止瓶壁及盖子上的粉末飞散损失，加入洗脱液后，拧紧瓶盖，充分混匀，必要时可振荡器震荡30s，如未及时用完可-20℃保存，但应避免反复冻融超过3次，可分装使用，以避免反复冻融。
2. 将试剂盒从4℃环境下取出使用时，最好在室温条件下静置10min后再加入样本进行实验。
3. 如试剂盒内液体不慎溅出接触皮肤和粘膜，立即用大量水冲洗即可。
4. 因检测的样本可能含有病毒，虽然经过试剂盒裂解后一般已无生物污染性，但仍需按照有生物污染性对待，使用过的试剂盒预装板及搅拌套要及时安全弃置。
5. 为避免试剂被污染，注意使用RNase-free的枪头及离心管，操作人员带双层手套三层口罩，并经常更换，室内减少人员走动。
【参考文献】
Hourfar, M. K., et al. "High-Throughput Purification of Viral RNA Based on Novel Aqueous Chemistry for Nucleic Acid Isolation." Clin Chem 51 7 (2005): 1217-22.
Poeckh, T., et al. "Adsorption and Elution Characteristics of Nucleic Acids on Silica Surfaces and Their Use in Designing a Miniaturized Purification Unit." Anal Biochem 373 2 (2008): 253-62.
【基本信息】
注册人（或者备案人）/生产企业名称：洛阳爱森生物科技有限公司
住所：中国（河南）自贸区洛阳片区蓬莱路2号国家大学科技园
联系方式：13683842418
售后服务单位名称：洛阳爱森生物科技有限公司
联系方式：13683842418
生产地址：洛阳市高新开发区三山路007号1幢 
【医疗器械生产备案凭证编号】：豫洛食药监械生产备20170015号
【医疗器械产品备案凭证编号】：豫洛械备20170041号
【医疗器械产品技术要求编号】：豫洛械备20170041号
【说明书核准及修改日期】2018年1月25日

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