粪便基因组DNA提取粪便的处理方法
Source:狄光辉Author:admin Addtime:2018/06/28 Click:
粪便基因组DNA提取过程一般是对肠道菌群的一个综合性分析的一个实验，所以粪便基因组DNA的提取是对肠道微生物分离提取的过程。
由于粪便，在我们看来是污秽之物，所以提取就显得和别的不一样。实际上不是的，提取过程和方法还是一样的。你就想象是在一个复杂样本中提取微生物的DNA.
1.第一种方法，分离微生物，然后对粪便进行菌种的筛选，扩大培养，然后对扩大后的菌体离心，加裂解液，用离心柱子或者醇沉淀，或者磁珠提取都可以
2.第二种方法，不分离，粪便研磨（最好液氮研磨），加裂解液，然后离心取上清，实际上DNA已经全部在上清里面了，然后再进行结合，洗涤洗脱就可以
注意事项：
1、新鲜的粪便样本会得到更高的产率，不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。
2、若溶液中出现浑浊可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈，不会影响结果。
3、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会堵塞吸附柱，并影响产物纯度。
4、洗脱缓冲液的体积最好不少于 50ul ，体积过小会影响回收效率；建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液，用水洗脱也会损失部分产物；DNA 应保存在-20 ℃避免反复冻融，以防降解。
5、 液体试剂避免接触皮肤，若意外接触应立即使用大量清水冲洗。
狄光辉 13683842418 QQ:625006192
