kingfisher磁珠法DNA/RNA提取试剂盒
Source:羧基磁珠Author:admin Addtime:2018/12/28 Click:
病毒 DNA/RNA 提取试剂盒
本试剂盒采用磁珠吸附 DNA/RNA 的方法达到快速纯化病毒DNA/RNA 的目的。适合于从 200 µl 体液(包括血浆,血清,腹水,组织研磨上清液,培养细胞上清液,脑脊髓液,尿液,脱落细胞悬浮液等) 中提取高纯度的病毒 DNA/RNA,用于 PCR/RT-PCR、Real-time PCR/Real-time RT-PCR 等分子生物学实验。
一、 试剂盒组成、贮存、稳定性
Cat. No. AS204
裂解液B:蛋白酶K,室温密闭贮存。
预封装试剂板:室温密闭贮存。
搅拌套:室温密闭贮存。
二、 注意事项
1)病毒具有很强的感染能力,操作前必须准备好各种防御措施。
2)严格按操作步骤进行,废物必须放入含消毒液的废物缸,以免污染实 验室和工作人员。
3)使用不含 DNA 和 RNA 酶的离心管、吸管、Tip 头、试剂和手套,工作人员戴口罩进行操作。
4)裂解液 AS 和洗涤液 AW 含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼 睛,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
三、 实验准备
1)取出深孔板后,请轻甩2-3次,将挂在孔壁和铝膜上的液体甩至深孔板底部,以防影响提取效果。
2)如果提取的是病毒 RNA,请选用 RNase free Tip 头和 1.5 ml 离心管或将 Tip 头和 1.5 ml 离心管用 0.1% DEPC 水处理后再使用,以避免纯化过程中病毒RNA 被RNase 降解。
四、 操作步骤
1.在 Lysis 深孔板中加入20ul裂解液B;
2.在 Lysis 深孔板中加入 200ul 血浆/血清/淋巴液/组织研磨液(样品需平衡至室温);
3.按次序将深孔板和搅拌套分别插入仪器指定位置,固定好后,启动 KingFisher 仪器,导入Viral DNA/RNA程序;
4.程序运行完毕后,取出Elution板,即得到样本的DNA或RNA。如不能及时进行下游实验,可用封口膜封好,DNA样本可保存于-20℃,RNA样本可保存于-80℃。
五、深孔板种类及用量
六、 常见问题及处理建议
常见问题 可能的原因 建议
得率低 取样前没有充分混匀样品 每次取样前充分混匀样品,使白细胞均匀的悬浮于样品中
裂解不充分 减少样品用量,或延长裂解时间
样品中病毒含量太低 增大样本量或浓缩样本,其他试剂用
量需根据实验情况适当调整
样品用量大于说明书给出量 严格按照说明书操作
无扩增条带或扩增条带不亮 用双蒸水代替洗脱液
S,但没有调节 pH 用 Tris 将双蒸水 pH 调至 8,代替洗
脱液S
乙醇残留 延长晾干时间
磁珠法DNA/RNA提取试剂盒 狄光辉 13683842418 Q:625006192