哎呀,你看我用了**家的土壤试剂盒,提取的浓度真心高啊,真好!
是吗?你做下游PCR实验了吗?
没有啊,但是肯定成功啊!这么高的浓度
那你做做先,记得做一个不同厂家试剂盒提取的核酸下游实验的对照哦
OK,好哒。
结果怎么样呢?
很奇怪,浓度高的PCR扩增的结果没有浓度低的好哈。
知道为什么吗?
额,还不是很清楚,以前不是说提取的浓度越高越吗?
在浓度和纯度面前,纯度才是最重要的,只有在保证纯度的情况下才能追求浓度啊!!
额,好吧!
核酸提取又叫核酸提取纯化,简单点就是裂解+纯化。裂解就是通过温度以及试剂将样本中的核酸游离在裂解液体系的过程。纯化就是使核酸与裂解体系中的其他杂质成分比如蛋白质,盐等彻底分离的过程。
核酸的检测方法
检测核酸质量的方法有很多,实验室常见的方法就是凝胶电泳、紫外分光光度计、PCR扩增。
PCR与电泳到底谁强?
众所周知,土壤核酸提取很容易失败,原因在于土壤通常是富含腐殖酸以及腐殖酸类似物。核酸提取的过程中,如果杂质去除的不干净就会直接影响下游的PCR实验。
曾有人说,你看我土壤提取的浓度多高,但是一做PCR扩增就发现电泳一片“漆黑”,新手总是百思不得其解。
其实很容易理解,因为核酸提取后的电泳图只能辅助我们判断提取的核酸的浓度,并不能成为检测核酸质量的标准。要想判断核酸提取的成功,做PCR扩增是最直接,最简单的方式。
磁珠法核酸提取试剂盒:www.ex-dna.com